默克高质量培养基如何操作
更新时间：2022-07-22 浏览次数：677
高质量培养基是通过将培养基的各个成分混合研磨成糊状，然后通过*的造粒工艺和Z后脱水制成的。颗粒培养基为实验室安全和产品质量带来许多好处。颗粒培养基优点明显：1、能显着减少培养基的飞尘，减少有毒成分的吸入，使用更安全。2、可减少操作者的过敏反应。3、可减少粉尘对实验室仪器、设备和衣服的污染。4、更容易称量。5、溶解速度快，不结块。6、可以延长保质期。7、安全，减少有毒有害成分的吸入和污染。8、防止组件分离和结块。9、成分分布均匀稳定，重现性好。10、称量方便，流动性好，防止粘壁。11、快速均匀地溶解在水中。
高质量培养基实验操作步骤：
1、基质胶包被的培养板：取出6孔板/12孔板，并加入1mL/0.5mL即用型基质胶（AC-1001007）移至每个孔，轻轻摇动6孔板/12孔板，使Matrigel*覆盖培养皿的底部。将其置于37℃的恒温箱中，保温1h〜2h。实验前将其取出，并放在干净的工作台/生物安全柜中以在室温下平衡。20分钟如果暂时不使用，可以用Parafilm密封并在2-8°C下保存并在1周内使用。
注意：①冷冻的干细胞数量约为1×106细胞/mL，相当于6孔板中的1个孔；②即用型基质胶对温度敏感，因此请在使用后立即拿走，并在使用后立即放回原处。储存在4°C的冰箱中，不要接触Matrigel液面的瓶体直接接触，将影响基质胶的质量。
2、首先将2〜3mL干细胞培养基添加到15mL离心管中，以备后用。
3、解冻：将从液氮中取出的冷冻保存管快速浸入37℃的温水中，并迅速摇动使其在1〜2min内解冻；注意：应迅速从液氮中取出电池，以尽量减少其暴露于室温的时间。
4、离心：将冻存管中的冻存溶液解冻后，滴加到装有干细胞培养基的15mL离心管中。将15mL离心管放入低速离心机中，然后以1200rpm离心。3分钟；
5、重悬：离心后，弃去上清液，加入1mL人多能干细胞培养基移液，吸干细胞沉淀约3至5次。
6、接种：均匀吹吸后，丢弃已平衡的即用型基质胶，将均匀吹干的干细胞悬液加入包被的6孔板中，并在每个孔中填充2mL训练系统。
7、高质量培养基培养：可将接种的6孔板置于倒置相差显微镜下，观察接种的干细胞的密度和细胞团的大小。超过4个细胞的团块更合格。水平的十字架很轻。摇动6孔板/12孔板以均匀分布细胞。在37°C和5％CO2的恒温培养箱中孵育。第二天观察细胞的粘附；
8、更换培养基：从复苏开始每隔24小时更换一次培养基。
高质量培养基是用于人类多能干细胞的培养基，它没有外来动物成分，化学成分清晰，并且适合无滋养细胞培养。该产品适用于系统中培养的干细胞，可用于干细胞传代。它含有防止细胞凋亡和分化的干细胞保护因子，并对细胞具有良好的保护作用。
1、不需要滋养细胞。
2、成分清晰，批次之间的差异很小。
3、适用于在Essential8系统中培养的人多能干细胞。
4、不含外来动物成分，大大降低了各种病毒，霉菌和支原体污染的风险。
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