吸光光度法测定的是显色反应达到平衡后溶液的吸光度，因此要得到准确的结果，必须从研究平衡着手，了解影响显色反应的因素，控制适当的条件，使显色反应和稳定。

1）根据溶液平衡原理，有色络合物的稳定常数越大，显色剂过量越多，越有利于待测组分形成有色络合物。但是过量显色剂的加入有时会引起副反应，对测定反而不利。

2）酸度对显色反应的影响是多方面的。一种金属离子与某种显色剂反应的适宜酸度范围是通过实验来确定的。确定的方法是固定待测组分及显色剂的浓度，改变溶液pH值，测定其吸光度，作出吸光度-pH值关系曲线，选择曲线平坦部分对应的pH值作为测定条件。

3）显色反应一般在室温下进行，有的反应需要加热，以加速显色反应，使之进行反应。

4）大多数显色反应需要经过一定的时间才能完成，其长短与温度的高低有关，也会受到空气的氧化或发生光化学反应使眼色颜色减弱。因此必须通过实验作出在一定温度下的吸光度-时间关系曲线，得到适宜的显色时间。

分光光度计在使用前，使用者应该首先了解该仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。