近年来，研究人员陆续报道了采用营养素、生长因子和激素取代血清，在无血清培养基中培养各种细胞系的方法。Mather和Sato（BBRC, 1985）报道在含有胰岛素、转铁蛋白、表皮生长因子、黄体生成素或促卵泡激素、生长调节素和生长激素的无血清培养基中，成功培养了Leydig和Sertoli细胞。

　　尽管其中的激素及其浓度专用于特定的细胞类型，但人们还是发现杜氏改良Eagle培养基（DMEM）与Ham's F-12营养混合液的1：1混合物适于这类研究。这种混合物名为 DMEM/F12培养基，含有21种氨基酸、10种维生素、葡萄糖、铁和锌等成分。

　　Sigma-Aldrich旗下的DMEM/F12是比DMEM更加营养和复杂的培养基。配方中可加入HEPES缓冲液（终浓度15 mM）补偿无血清造成的缓冲能力损失。这种合成培养基不含任何血清、蛋白质、脂质或生长因子，因此需要根据细胞培养类型补充胎牛血清(FBS)等营养成分。某些商业配方可能含有谷氨酰胺或酚红。

　　Sigma-Aldrich DMEM/F12 培养基的应用

　　改良后的DMEM/F12基础培养基通常用于需要低血清或无血清的培养应用，如三维类器官培养或干细胞培养。DMEM/f12 培养基还可用于优化需要低血清或无血清条件的细胞转染。

　　除了通常需要低血清或无血清环境的干细胞培养，原代细胞也可在 DMEM/F12 培养基中培养，其中包括成纤维细胞、MDCK 细胞、神经细胞系、神经胶质细胞和平滑肌细胞。与补充高浓度血清的原代细胞相比，它们表现出同等或更生长趋势和功能。用 DMEM/F12 培养基培养的细胞也显示出与高血清条件下培养的细胞相同的细胞形态。